1. Når du bestemmer endotoksin i blod, skal du være opmærksom på valget af metoder og reagenser.

2. Fremstilling af plasma eller serum

Som en almindelig klinisk prøve er plasma hovedprøven, og dens udnyttelsesgrad er mere end 95%. Derfor er det meget vigtigt at forberede plasma som hoveddelen af ​​kropsvæsken. Ifølge Das er endotoksin generelt knyttet til blodplader ud over dets frie tilstand, så det er mere hensigtsmæssigt at bruge plasma indeholdende et stort antal blodplader som prøve. Ved fremstilling af humant plasma eller animalsk plasma, for at forhindre celleskade, bruger fremmede lande for det meste lavtemperaturseparation ved at bruge plasmaprøver indeholdende et stort antal blodplader, det vil sige ved 4 ℃ 1000gx10 minutters separationsbetingelser eller 3000gx40 sekunders separationsbetingelser, når der ikke er nogen lavtemperaturcentrifuge. Det er ikke tilladt at udføre højhastigheds- og langtidsadskillelse under normale temperaturer. Desuden bør bakteriel kontaminering undgås ved adskillelse af plasma eller serum.

Klargøring af serum: Brug en sprøjte uden antikoagulant til at opsamle blod og overføre det til et centrifugerør, og anbring det i et isvandsbad i 30 minutter ved 4 ℃, 1000xg, 10 minutter til centrifugering.

Efter adskillelse af plasma eller serum, hvis det ikke bruges midlertidigt, kan det fryses ved -80 ℃ og bruges inden for 1 måned. Bemærk For at undgå adsorption af endotoksin skal du bruge et reagensglas i glas til opbevaring.

3. Typer og virkninger af antikoagulantia

Under fremstillingen af ​​plasma har typen og mængden af ​​antikoagulantia på grund af tilsætning af visse antikoagulantia stor indflydelse på genvindingshastigheden. Generelt omfatter almindeligt anvendte antikoagulantia hovedsageligt heparin, natriumcitrat og EDTA, blandt hvilke heparin er det mest udbredte. Vi ved dog, at en stor mængde heparin vil interferere med endotoksinreaktionen, især for fortyndingsopvarmningsmetoden og kloroformekstraktionsmetoden, hvilket vil reducere genvindingshastigheden, men have mindre indflydelse på PCA-metoden, så mængden af ​​tilsat heparin og frigivet under plasmaforberedelse behøver kun 2~5 μ L/ml er nok.