1. Tilføj prøver: Tilsæt prøvefortyndingen til den coatede plade, fortynd serumet i PBS eller saltvand ved 1:20, og tilsæt derefter 10 ul til reaktionsbrøndene på mikropladen.
2. Kontroltilsætning: 3-brønds negativ kontrol, 1-brønds positiv kontrol og 100 ul kontrolserum.
3. Inkubation: Ryst reaktionspladen for at blande prøven godt, og anbring den derefter i en 37 ° C inkubator eller vandbad i 20 minutter.
4. Gulvvask: Fortynd 15 ml vaskeopløsning til 300 ml med destilleret vand. Ved håndvask skal indholdet af reaktionspladeluften hældes ud og placeres i hullet fyldt med vaskemiddel, og derefter stå 30 for at ryste voldsomt. Gentag denne operation 5 gange og pisk den tør. Maskinen skal udføre 5 gange. 200 ul vaskeopløsning kan sprøjtes ind i hver brønd eller fyldes, og efterlades i 30 minutter og duppes.
5. Tilføj enzymmærket arbejdsopløsning: Tilsæt 100 ul enzymmærket arbejdsopløsning til hver brønd i en 37 ° C inkubator og vask pladen fem gange efter 20 minutter. Vaskepladen er den samme som i trin 4.
6. Dette er det sidste trin af reaktionen med farveudvikling og reaktionsafslutning: 50 ul af substratet tilsættes til reaktionsbrønden, og farven fremkaldes i 10 minutter i mørke ved 37°C. Opløsningen i hver brønd blev stoppet og blandes for at afslutte reaktionen. Brugen af mikropladerne skal udføres under sterile forhold. Desinficer og rengør forsigtigt pladerne efter brug, men bemærk, at nogle plader skal læse instruktionerne omhyggeligt for at se, om de kan steriliseres ved høje temperaturer.